目前，如果想知道河流、湖泊、水庫等地表水是否富營養(yǎng)化，可以通過檢測水中磷、氮等營養(yǎng)物質(zhì)的含量，或者通過觀察水中藻類的繁殖情況來判斷。 .但是我們今天要講的是通過檢測水中的葉綠素a來判斷水體是否富營養(yǎng)化。我們都知道，水體富營養(yǎng)化最重要的表現(xiàn)就是藻類在水中的大量繁殖，而所有的藻類都含有葉綠素a。因此，可以通過水體中葉綠素a的含量來判斷水中藻類的數(shù)量。

該方法的原理是用濾膜過濾一定量的樣品以截留藻類，研磨破碎藻類細胞，用丙酮溶液提取葉綠素，在750nm、664nm、647nm和630nm波長測量提取物的吸光度離心后。該公式計算了水中葉綠素 a 的濃度。收集河流中的葉綠素 a 水樣
測試所需的試劑和儀器
實驗試劑
1 丙酮。
2 碳酸鎂。
3 丙酮溶液：9+1。
將 100ml 實驗用水加入到 900ml 丙酮中。
4 碳酸鎂懸浮液。
稱取1.0g碳酸鎂，加入100ml實驗水，攪拌成混懸液（使用前搖勻）。
5 玻璃纖維膜：直徑47mm，孔徑0.45um-0.7um。
實驗設(shè)備
1 個采樣瓶：1L 或 500ml 棕色玻璃瓶，帶接地塞。
2過濾裝置：配備真空泵和玻璃砂過濾裝置。
3 研磨裝置：玻璃研缽或其他組織研磨機。
4 離心機：相對離心力可達1000×g（轉(zhuǎn)速3000r/min～4000r/min）。
5 玻璃刻度離心管：15ml，螺帽材料不與丙酮反應(yīng)。
6 可見分光光度計：帶 10mm 石英比色皿。
7 注射器過濾器：0.45um PTFE 有機相注射器過濾器。
8 通用實驗室儀器和設(shè)備。
水樣采集和保存
水樣一般使用有機玻璃集水器或其他合適的采樣器采集對于水面以下0.5m的水樣，可根據(jù)需要在湖泊、水庫中進行分層采樣或混合采樣，采樣量為1L或500ml。如果水樣中含有沉積固體（如沉積物等），
水樣應(yīng)充分搖勻，然后倒入 2L 量筒中。讓它在黑暗中靜置 30 分鐘，在水面以下 5cm 處取一個水樣并轉(zhuǎn)移到取樣瓶中。向每升水樣中加入 1 ml 碳酸鎂懸浮液，以防止酸化導致顏料溶解。
水樣采集后應(yīng)在0°C-4°C避光儲存和運輸，24小時內(nèi)運至檢測實驗室過濾（如水樣24小時內(nèi)不能送至檢測實驗室，應(yīng)現(xiàn)場過濾，濾膜避光（冷藏運輸），水樣濾膜-20℃避光保存，14天內(nèi)完成分析。
準備水樣
在過濾器單元上安裝玻璃纖維過濾器。根據(jù)水體的營養(yǎng)狀況確定采樣量。有關(guān)詳細信息，請參閱過濾水樣的體積。用量筒量取一定體積的混合水樣，過濾，最后用少量蒸餾水沖洗濾壁。過濾時，負壓不應(yīng)超過50kPa。當水樣剛剛完全通過濾膜時，抽濾結(jié)束。用鑷子取出濾膜，有水樣的一面對折，濾膜用濾紙擦干。
葉綠素 a 是指過濾樣品的體積
研磨
將樣品過濾器放入研磨器中，加入3ml-4ml丙酮溶液，研磨成糊狀。加入3ml-4ml丙酮溶液，繼續(xù)研磨，重復1-2次，保證5min以上充分研磨。將完全破碎的細胞提取物轉(zhuǎn)移到玻璃刻度離心管中，用丙酮溶液沖洗研缽和研杵，并一起轉(zhuǎn)移到離心管中，并調(diào)整體積至10ml。
浸入式萃取
將離心管中的研磨提取液充分搖勻混勻后，用鋁箔包裹，4℃避光放置2小時以上，但不超過24小時。浸泡過程中顛倒搖晃2-3次。
離心
將離心管放入離心機中，以1000×g（3000 r/min～4000 r/min）的相對離心力離心10分鐘。然后用針頭過濾器過濾上清液，得到葉綠素a的丙酮提取物（樣品）供檢測。
檢測步驟
水樣的測定
將樣品移至比色皿中，以丙酮溶液為參比溶液，分別在 750nm、664nm、647nm 和 630nm 波長處測量吸光度。 750nm波長處的吸光度應(yīng)小于0.005，否則需用針頭過濾器再次過濾后再測定。
最終水樣中葉綠素a的質(zhì)量濃度可按相應(yīng)公式計算。
以上內(nèi)容來自《HJ 897-2017 水質(zhì)中葉綠素a的分光光度法測定》